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花卉品種

首頁 > 研究成果 > 花卉品種 > 建立蝴蝶蘭、拖鞋蘭花粉基因轉移技術

建立蝴蝶蘭、拖鞋蘭花粉基因轉移技術

   蝴蝶蘭與拖鞋蘭是台灣重要的花卉產業,當前正面臨歐洲花卉強國及中國大陸的競爭。基因轉移技術是新興的育種技術,台灣目前在蝴蝶蘭與拖鞋蘭基因轉移技術都面臨基因轉殖不易的障礙,雖然目前已有少部分蝴蝶蘭基因轉殖成功的例子,不過卻面臨組織培養品種差異性大的瓶頸。 利用農桿菌 EHA105 進行農桿菌基因轉移試驗,利用 GFP (green florescence protein) 螢光蛋白做為報導基因 (reporter gene) ,將此基因構築於 p CAMBIA 載體上,所以後續分析轉殖植株時可以利用螢光顯微鏡直接觀察。採取蝴蝶蘭或拖鞋蘭的花粉塊在適當誘導下進行農桿菌感染,然後進行授粉及種子無菌播種,經 hygromycin 抗生素篩選存活小苗,利用 PCR 檢測 35S 啟動子 (promoter) 、 GFP 基因及 NOS 終結子 (terminator) ,可發現預期片段且三基因片段具一致性。 初步已經建立蝴蝶蘭與拖鞋蘭的花粉基因轉移之流程,經過 GFP 報導基因的研究發現 ( 圖一 ) ,其蝴蝶蘭與拖鞋蘭的轉殖效率約 0.3 及 0.5% 。

(a)是在白光下的原球體 (b)是在藍光激發下經Bandpass濾片下相對應之原球體 (c)是在藍光激發下經Longpass濾片下相對應之原球體
(d)是在白光下的原球體 (e)是在藍光激發下經Bandpass濾片下相對應之原球體 (f) 是在藍光激發下經Longpass濾片下相對應之原球體
圖一、蝴蝶蘭種子發芽後於螢光顯微鏡下觀察, (a)(d) 是在白光下的原球體; (b)(e) 是在藍光激發下經 Bandpass 濾片下相對應之原球體; (c)(f) 是在藍光激發下經 Longpass 濾片下相對應之原球體。

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